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【志珩】生物工程下游技術(shù) ,涉及固液分離、全發(fā)酵液提取等技術(shù)和設(shè)備
從古至今,人類都沒有放棄對(duì)發(fā)酵工程的研究,在當(dāng)今生物工程技術(shù)中它是一種“舊改新”的技術(shù),同時(shí)生物分離也是生物產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)化的必經(jīng)之路,分離效率直接決定產(chǎn)品的生產(chǎn)成本,因此生物工業(yè)下游技術(shù)的發(fā)展日益受到研究者的重視。
從廣義上講,發(fā)酵工程由三部分組成:上游工程,發(fā)酵工程和下游工程。其中,下游工程指從發(fā)酵液中分離和純化產(chǎn)品的技術(shù):包括固液分離技術(shù)(離心分離,過濾分離,沉淀分離等工藝);細(xì)胞破壁技術(shù)(超聲,高壓剪切,滲透壓,表面活性劑和溶壁酶等);蛋白質(zhì)純化技術(shù)(沉淀法,色譜分離法和超濾法等)。
本質(zhì)上,如何從混合原料中高效,快速,特異捕獲目標(biāo)物質(zhì)是下游技術(shù)的首要解決問題?這里對(duì)其中的固液分離技術(shù)的原理,方法和設(shè)備做一概括。
1,目標(biāo)物在胞內(nèi),通過固液分離才可以收集胞內(nèi)產(chǎn)物的細(xì)胞或菌體,除去液相;
2,分離除去細(xì)胞碎片,獲得胞內(nèi)的目標(biāo)物;
3,目標(biāo)物在液相中,通過固液分離收集含生化物質(zhì)的液相,除去固體懸浮物,如細(xì)胞,菌體,細(xì)胞碎片,蛋白質(zhì)的沉淀物和它們的絮凝體等。
1,傳統(tǒng)的固液分離適用于物理狀態(tài)不同的固液混合體;
2,從發(fā)酵液中除去菌體細(xì)胞;
3,除去細(xì)胞分裂后的細(xì)胞碎片;
4,沉淀出的蛋白質(zhì)或其他無(wú)機(jī)鹽等物質(zhì);
5,因此有時(shí)需要通過凝聚或絮凝等創(chuàng)設(shè)條作加固形物。同時(shí),也降低了粘度;
6,現(xiàn)在基于粒度不同:膜技術(shù),雙水相萃取,擴(kuò)展床吸附等。
其目的在于在于分離細(xì)胞,菌體和其他懸浮顆粒,還希望除去一部分雜質(zhì)并改變其性質(zhì),以利于后續(xù)的各步操作。
對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行預(yù)處理可以促進(jìn)從懸浮液中分離固形物的速度,提高固液分離的效率:
加熱法:加熱可降低液體的黏度,根據(jù)流體力學(xué)的原理,如何通過濾餅的速率與液體的黏度成反比,可見降低液體黏度可有效提高過濾速率;同時(shí),在適當(dāng)?shù)臏囟群褪軣釙r(shí)間下迅速轉(zhuǎn)換例如,鏈霉素發(fā)酵液,調(diào)酸至PH3.0后,加熱至70℃,維持半小時(shí),其黏度下降至原來(lái)的1/6,過濾速度可增加10?100倍。
調(diào)節(jié)懸浮液的PH值: PH值直接影響發(fā)酵液中某些物質(zhì)的電離度和混合物性質(zhì),因此適當(dāng)調(diào)節(jié)發(fā)酵液的PH值可改善其過濾特性 。的方法之一。
凝聚和絮凝:凝聚和絮凝都是懸浮液預(yù)處理的重要方法 ,其處理過程就是將化學(xué)藥劑預(yù)先加入到懸浮液中 ,改變細(xì)胞,細(xì)胞碎片,菌體和Pro等膠體粒子的分散狀態(tài),破壞其穩(wěn)定性,轉(zhuǎn)變凝結(jié)成裂的顆粒,適當(dāng)提高過濾速率,而且能有效地除去雜蛋白和固體雜質(zhì),提高分辨率質(zhì)量。但凝聚和絮凝是兩種不同的方法,其具體處理過程還是有差異的,應(yīng)該明確區(qū)分開來(lái),不可取代。
(1)凝聚:指向膠體懸浮液中加入某種電解質(zhì),在電解質(zhì)異電離子作用下,膠體粒子的雙電層電位降低,從而使膠體失去穩(wěn)定性散射粒子相互凝聚成1mm左右大小的塊狀凝聚體的過程。
(2)絮凝:指使用絮凝劑將膠體粒子交聯(lián)成網(wǎng),形成10mm左右大小的絮凝團(tuán)的過程。其中絮凝劑主要起架橋作用。采用凝聚方法得到的凝聚體,其顆粒往往只有1mm左右,比較細(xì)小,有時(shí)不能有效地進(jìn)行分離。而采用絮凝方法則?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">?尚纬纱执蟮男跄w(10mm左右),使發(fā)酵液較容易分離。
從古至今
從廣義上講
本質(zhì)上
1,目標(biāo)物在胞內(nèi),通過固液分離才可以收集胞內(nèi)產(chǎn)物的細(xì)胞或菌體,除去液相;
2,分離除去細(xì)胞碎片,獲得胞內(nèi)的目標(biāo)物;
3,目標(biāo)物在液相中,通過固液分離收集含生化物質(zhì)的液相,除去固體懸浮物,如細(xì)胞,菌體,細(xì)胞碎片,蛋白質(zhì)的沉淀物和它們的絮凝體等
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3,除去細(xì)胞分裂后的細(xì)胞碎片
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其目的在于在于分離細(xì)胞
對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行預(yù)處理可以促進(jìn)從懸浮液中分離固形物的速度,提高固液分離的效率:
加熱法:加熱可降低液體的黏度
調(diào)節(jié)懸浮液的PH值: PH值直接影響發(fā)酵液中某些物質(zhì)的電離度和混合物性質(zhì)
凝聚和絮凝:凝聚和絮凝都是懸浮液預(yù)處理的重要方法
(1)凝聚:指向膠體懸浮液中加入某種電解質(zhì)
(2)絮凝:指使用絮凝劑將膠體粒子交聯(lián)成網(wǎng)